关于离子交换色谱法(离子交换色谱阳离子顺序?)
关于离子交换色谱法
A trans [Co(en)2Cl2]ClB [Co(NH3)5NO3](NO3)2
C K[CoEDTA]
以上那种物质在实验时与阳离子交换树脂的结合性最差(换言之,通过试管的速度最差)?
打错字了, "通过试管的速度最快"
离子交换树脂对溶液中的不同离子有不同的亲和力,对它们的吸附有选择性。各种离子受树脂交换吸附作用的强弱程度有一般的规律,但不同的树脂可能略有差异。主要规律如下:
(1) 对阳离子的吸附
高价离子通常被优先吸附,而低价离子的吸附较弱。在同价的同类离子中,直径较大的离子的被吸附较强。一些阳离子被吸附的顺序如下:
Fe3+ > Al3+ > Pb2+ > Ca2+ > Mg2+ > K+ > Na+ > H+
(2) 对阴离子的吸附
强碱性阴离子树脂对无机酸根的吸附的一般顺序为:
SO42-> NO3- > Cl- > HCO3- > OH-
弱碱性阴离子树脂对阴离子的吸附的一般顺序如下:
OH-> 柠檬酸根3- > SO42- > 酒石酸根2- >草酸根2- > PO43- >NO3- > Cl- >醋酸根- > HCO3-
(3) 对有色物的吸附
糖液脱色常使用强碱性阴离子树脂,它对拟黑色素(还原糖与氨基酸反应产物)和还原糖的碱性分解产物的吸附较强,而对焦糖色素的吸附较弱。这被认为是由于前两者通常带负电,而焦糖的电荷很弱。
通常,交联度高的树脂对离子的选择性较强,大孔结构树脂的选择性小于凝胶型树脂。这种选择性在稀溶液中较大,在浓溶液中较小。
你这不是简单离子,而是络合离子,而且不清楚是什么样的交换树脂。只能一般判断,B通过速度最快。
离子交换色谱阳离子顺序?
先通阳离子,因为阳离子交换柱吸收阳离子释放H+,随后在阴离子柱吸收阴离子释放OH-,H+与OH-结合成水。若先通阴离子,则生成的OH-与阳离子生成沉淀,污染阴离子柱。下面分享相关内容的知识扩展:
thermo离子交换sax使用 ***
Thermo 离子交换色谱柱使用首先,感谢您选择性能优越的Thermo色谱柱产品。
为了使您的色谱柱能发挥更大的性能,敬请先阅读以下说明:
1、适用类型
Thermo离子交换色谱柱包括:BioBasic AX,SCX,Hypersil SAX,Hypersil Gold AX,SAX等。
2、柱体积
色谱柱的柱体积可以通过以下公式估算:
V=0.68 πr2L
V为色谱柱柱体积(mL),r为色谱柱内径(cm),L为色谱柱长度(cm)。
3、色谱柱柱效测试与保存
离子交换色谱柱出厂时都经过柱效测试,请参考柱效报告。
在条件允许情况下,请对新色谱柱进行柱效测试。
离子交换色谱柱出厂时均保存在乙醇溶液中(如有不同,以柱效报告为准)。
4、温度
所有硅胶基质色谱柱使用温度应低于60℃。
5、样品
更好将样品溶解在流动相或极性相近的溶剂中。如果使用梯度洗脱,则需要将样品溶解在初始流动相或极性相近的溶剂中。
样品溶液不应含有任何颗粒物,更好使用0.5μm或更小粒径的滤膜过滤。同时建议在色谱系统中使用在线过滤器。
6、流动相
所用溶剂通常为水、乙腈、甲醇等,Thermo的离子交换色谱柱可以100%水为流动相,进行盐的梯度洗脱。
流动相中含有机相时,请注意降低盐的浓度,以防止溶剂混合后盐从流动相中析出。更换流动相时也要注意这一问题,可先用含较高纯水的流动相除盐过渡。
请将流动相的pH值控制在2-8。缓冲盐浓度在500 mM以下。
所有流动相,更好当日实验当日配制,并使用2μm滤膜过滤。
7、色谱柱安装
请小心操作色谱柱。
不要摔、碰色谱柱,这样会损坏色谱柱床,使色谱柱性能下降。
使用合适的连接管路和接头,确保色谱柱连接处死体积降到更低(使用不锈钢接头时需要尤其注意)。我们建议使用SLIPFREE 接头,此接头与Thermo色谱柱以及其他品牌色谱柱均完美匹配。
8、色谱柱平衡
新柱在使用前,请预先用20倍柱体积甲醇/或乙腈冲洗色谱柱,然后以初始流动相(不含盐)冲洗10倍柱体积。
在进行正式分析之前,请使用至少20倍柱体积的流动相冲洗色谱柱,以使色谱柱达到平衡。
9、色谱柱保护
对于成分复杂的“脏”样品以及组分未知的样品,请尽量使用在线滤器或保护柱,如果可能,使用SPE小柱对样品进行前处理是更好的选择。上述做法可以有效延长色谱柱使用寿命。
10、色谱柱清洗
常规清洗:
每天完成分析之后,用100% 水冲洗30倍柱体积除盐,然后用20% 甲醇/或乙腈冲洗20个柱体积,保存在20% 甲醇/或乙腈中。
清洗强保留污染物:
如果发现离子交换色谱柱柱效出现大幅下降,可通过如下 *** 清洗离子交换色谱柱:首先用高浓度的缓冲盐溶液清洗(浓度是流动相的5-10倍,但不得超过1M),冲洗30倍柱体积。用100% 水冲洗20倍柱体积以除盐后,再用100%甲醇/或乙腈清洗30倍柱体积。最后用20%甲醇/或乙腈水溶液(不含盐)保存。
11、色谱柱保存
用100% 水冲洗30倍柱体积除盐后,若短期不使用(<1周),用20% 甲醇/或乙腈冲洗20倍柱体积后,保存在20% 甲醇/或乙腈中;若需长期放置(>1周),用50% 甲醇/或乙腈冲洗20倍柱体积后,保存在50% 甲醇/或乙腈中。
注意:如果违反上述规程,可能使色谱柱失去保修。
能否用离子交换柱测定 *** ?为什么?
不行因为离子交换色谱(ion exchange chromatography, IEC)以离子交换树脂作为固定 相,树脂上具有固定离子基团 及可交换的离子基团。
相带着组分电离生成的离子通 过固定相时,组分离子与树脂 上可交换的离子基团进行可逆 变换。根据组分离子对树脂亲 合力不同而得到分离。
蛋白质等生物大分子的分离提取应选用哪种离子交换剂?为什么
蛋白质是高相对分子质量化合物,它的体积比无机离子大得多。蛋白质是带有许多可解离基团的多价态的两性电解质,在不同ph下,可以带不同数目的正负电荷。蛋白质有四级结构,只有在温和条件下,才能维持高级结构,否则将遭到破坏而变性,因此,蛋白质百度id老山野狗转载请注明出处分离纯化剂除了需要一般离子交换剂的性质外,还需要:1.具有良好的亲水性,2.具备均匀的大网结构(以容纳大体积蛋白质),3.选择适当电荷密度的交换剂(以免引起蛋白质空间构象变化失活),4.粒度越小,分辨率越高,主要有粗,中粗,细,超细等不同规格,要求粒径均匀,7.一般有工业级,分析级,生物级,分子生物级等不同级别。常见类目:1.多糖类,又分为纤维素骨架,交联葡聚糖,交联琼脂糖等
2.聚乙烯醇类,3.聚丙烯酸羟乙酯类,4.Mono系离子交换树脂
参考自《生物分离原理及技术》第二版,欧阳平凯著,版权所有:南京工业大学
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